Een wêreld een stryd
─ Internasionale samewerking om 'n wêreldgemeenskap van gemeenskaplike lot op te bou wat reageer op Covid-19-pandemiese uitdaging
Die roman Coronavirus wat oor die hele wêreld vee, het gelei tot 'n voortdurende wêreldwye Covid-19-pandemiese krisis. Die roman Coronavirus het geen grense nie, geen land sal gespaar word uit hierdie stryd teen Covid-19 nie. In reaksie op hierdie wêreldwye Covid-19-pandemie, lewer Liming Bio-Products Corp 'n bydrae om die welstand van ons wêreldgemeenskappe te ondersteun.
Ons wêreld word tans gekonfronteer met die ongekende impak van die nuwe Coronavirus Disease 2019 (Covid-19) Pandemic. Daar is tot dusver geen doeltreffende middel beskikbaar vir die behandeling van hierdie siekte nie. Baie diagnostiese toetse is egter ontwikkel vir die opsporing van COVID-19. Hierdie toetse is gebaseer op molekulêre of serologiese metodes om die nuwe coronavirus -spesifieke nukleïensuur of teenliggaampie -biomerkers op te spoor. Aangesien Covid-19 'n pandemiese status bereik het, is die vroeë diagnose van die nuwe coronavirus-infeksie van kritieke belang in die beoordeling van die verspreiding van die virus en dit bevat, maar 'n perfekte toets vir universele gebruik bestaan nog nie. Ons moet weet watter toetse moontlik gebruik kan word vir sifting, diagnose en monitering van die COVID-19-infeksie, en wat is die beperkings daarvan. Dit is baie belangrik hoe om hierdie wetenskaplike instrumente beter te benut en om die opkoms van hierdie vinnig verspreide en ernstige siekte te identifiseer en te beheer.
Die doel van die opsporing van die nuwe coronavirus is om te bepaal of 'n individu wat Covid-19-infeksie het, of 'n asimptotiese draer wat die virus stil kan versprei, noodsaaklike inligting verskaf om besluitneming vir kliniese behandeling te lei. Vorige studies het getoon dat 70% van die kliniese besluite afhang van die toetsresultate. As verskillende opsporingsmetodes gebruik word, is die vereistes van die opsporingsreagensstelle ook anders.
Figuur 1
Figuur1:Diagram wat die sleutelfases van algemene biomerkersvlakke toon tydens die tipiese tydsverloop van COVID-19-infeksie. Die x-as dui die aantal dae van infeksie aan, en die y-as dui op die virale las, konsentrasie van antigene en konsentrasie van teenliggaampies in verskillende periodes. Teenliggaam verwys na IgM- en IgG -teenliggaampies. Beide RT-PCR en antigeenopsporing word gebruik om die teenwoordigheid of afwesigheid van nuwe coronavirus op te spoor, wat direkte bewys is vir vroeë pasiëntopsporing. Binne 'n week van virusinfeksie word PCR -opsporing of antigeenopsporing verkies. Na die roman Coronavirus -infeksie vir ongeveer 7 dae, het die IgM -teenliggaampie teen die nuwe coronavirus geleidelik in die bloed van die pasiënt toegeneem, maar die duur van die bestaan is kort, en die konsentrasie daarvan neem vinnig af. In teenstelling hiermee verskyn die IgG -teenliggaam teen die virus later, gewoonlik ongeveer 14 dae na die virusinfeksie. Die IgG -konsentrasie neem geleidelik toe, en dit duur 'n lang periode in die bloed. As die IgM dus in die bloed van die pasiënt opgespoor word, beteken dit dat die virus onlangs besmet is, wat 'n vroeë infeksie -merker is. As die IgG -teenliggaampie in die bloed van die pasiënt opgespoor word, beteken dit dat die virusinfeksie al 'n geruime tyd was. Dit word ook laat infeksie of vorige infeksie genoem. Dit word gereeld gesien by pasiënte wat in die herstelfase is.
Die biomerkers van die roman Coronavirus
Die nuwe coronavirus is 'n RNA -virus wat bestaan uit proteïene en nukleïensure. Die virus val die gasheer (menslike) liggaam binne, gaan selle in deur die bindingsplek wat ooreenstem met die reseptor ACE2, en herhaal in gasheerselle, wat veroorsaak dat die menslike immuunstelsel op buitelandse indringers reageer en spesifieke teenliggaampies produseer. Daarom kan die flessie nukleïensure en antigene, en spesifieke teenliggaampies teen nuwe coronavirus teoreties as spesifieke biomerkers gebruik word vir die opsporing van die nuwe coronavirus. Vir nukleïensuuropsporing word RT-PCR-tegnologie die algemeenste gebruik, terwyl serologiese metodes gereeld gebruik word vir die opsporing van die nuwe coronavirus-spesifieke teenliggaampies. Daar is tans 'n verskeidenheid toetsmetodes beskikbaar wat ons kan kies vir die toets van COVID-19-infeksie [1].
Basiese beginsels van hooftoetsmetodes vir nuwe coronavirus
Baie diagnostiese toetse vir COVID_19 is tot dusver beskikbaar, met meer toetsstelle wat elke dag goedkeuring ontvang onder 'n noodgebruikmagtiging. Alhoewel die nuwe toetsontwikkelings met soveel verskillende name en formate uitkom, vertrou al die huidige Covid_19-toetse basies op twee belangrike tegnologieë: nukleïensuuropsporing vir die virale RNA en serologiese immunoassays wat virale spesifieke teenliggaampies (IgM en IgG) opspoor.
01. nukleïensuuropsporing
Omgekeerde transkripsie-polimerase kettingreaksie (RT-PCR), lus-gemedieerde isotermiese versterking (LAMP) en volgende generasie volgorde (NGS) is die algemene nukleïensuurmetodes vir die opsporing van nuwe Coronavirus RNA. RT-PCR is die eerste tipe toets vir COVID-19, wat aanbeveel word deur sowel die Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) as die Amerikaanse Sentrum vir Siektebeheer en -voorkoming (CDC).
02. Serologiese opsporing van teenliggaampies
Teenliggaampie is 'n beskermende proteïen wat in die menslike liggaam geproduseer word in reaksie op die virusinfeksie. Die IgM is 'n vroeë tipe teenliggaampie, terwyl IgG 'n latere tipe teenliggaam is. Die serum- of plasmamonster word gewoonlik ondersoek vir die teenwoordigheid van spesifieke IgM- en IgG-tipes van die teenliggaampie vir die assessering van akute en herstellende fases van COVID-19-infeksie. Hierdie teenliggaam-gebaseerde opsporingsmetodes sluit in kolloïdale goue immunochromatografie-toets, latex of fluoresserende mikrosfeer-immunochromatografie, ensiem-gekoppelde immunosorbent-toetsing (ELISA) en chemiluminescentie-toetsing.
03.Virale antigeenopsporing
Antigeen is 'n struktuur op die virus wat deur die menslike liggaam erken word wat die immuunverdedigingstelsel veroorsaak om teenliggaampies te produseer om die virus uit bloed en weefsels skoon te maak. 'N Virale antigeen wat op die virus teenwoordig is, kan geteiken en opgespoor word met behulp van immuno -toetsing. Soos virale RNA, is virale antigene ook teenwoordig in die asemhalingskanaal van besmette individue en kan dit gebruik word om akute fase van die Covid-19-infeksie te diagnoseer. Daarom word dit dikwels aanbeveel om boonste asemhalingsmonsters soos speeksel, nasofaryngeale en orofaringeale depper, diep hoessputum, brongoalveolêre spoelwater (BALF) vir aanvanklike antigeen -toetsing te versamel.
Kies van toetsmetodes vir nuwe coronavirus
Die keuse van 'n toetsmetode behels baie faktore, insluitend kliniese instelling, toetsing van kwaliteitskontrole, omkeertyd, toetsingskoste, monsternemingsversamelingsmetodes, laboratoriumpersoneel tegniese vereistes, fasiliteit en toerustingvereistes. Die opsporing van nukleïensure of virale antigene is om direkte bewys te lewer van die teenwoordigheid van die virusse en die diagnose van nuwe coronavirus -infeksie te bevestig. Alhoewel daar baie metodes vir antigeenopsporing is, is hul opsporingsgevoeligheid van die nuwe coronavirus teoreties laer as dié van die RT-PCR-versterking. Teenliggaamtoetsing is die opsporing van anti-virus-teenliggaampies wat in die menslike liggaam geproduseer word, wat betyds agterbly en dikwels nie gebruik kan word vir vroeë opsporing tydens die akute fase van virusinfeksie nie. Die kliniese instelling vir opsporingstoepassings kan wissel, en die monsterversamelingswebwerwe kan ook anders wees. Vir die opsporing van virale nukleïensure en antigene, moet die monster versamel word in die asemhalingskanaal waar die virus teenwoordig is, soos nasofaryngeale depper, orofaryngeale depper, sputum of brongoalveolêre lavage vloeistof (BALF). Vir teenliggaampie-gebaseerde opsporing moet bloedmonster versamel en ondersoek word vir die teenwoordigheid van spesifieke anti-virus-teenliggaampie (IgM/IgG). Teenliggaampie- en nukleïensuurtoetsresultate kan mekaar egter aanvul. Byvoorbeeld, as die toetsresultaat die nukleïensuur-negatiewe, IgM-negatiewe maar IgG-positief is, dui hierdie resultate daarop dat die pasiënt nie tans die virus dra nie, maar herstel is van die nuwe coronavirus-infeksie. [2]
Voor- en nadele van nuwe Coronavirus -toetse
In die diagnose- en behandelingsprotokol vir nuwe coronavirus -longontsteking (proefweergawe7) (vrygestel deur die Nasionale Gesondheidskommissie en Staatsadministrasie van tradisionele Chinese medisyne op 3 Maart 2020), word nukleïensuurtoetsing gebruik as die goue standaardmetode vir die diagnose van die roman Coronavirus -infeksie, terwyl teenliggaamtoetsing ook beskou word as een van die bevestigingsmetodes vir die diagnose.
Patogene en serologiese bevindings
(1) Patogene bevindings: Nuwe coronavirus-nukleïensuur kan opgespoor word in nasofaryngeale depper, sputum, sekresies van die onderste asemhalingskanale, bloed, ontlasting en ander monsters met behulp van RT-PCRAND/of NGS-metodes. Dit is meer akkuraat as monsters verkry word uit die onderste asemhalingskanaal (sputum of ekstraksie van die lugweg). Die monsters moet ingedien word om so gou as moontlik na die versameling te toets.
(2) Serologiese bevindings: NCP-virusspesifieke IgM word ongeveer 3-5 dae na aanvang waarneembaar; IgG bereik 'n titrasie van ten minste 4-voudige toename tydens herstel in vergelyking met die akute fase.
Die seleksie van toetsmetodes hang egter af van geografiese liggings, mediese regulasies en kliniese instellings. In die VSA het die NIH Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) behandelingsriglyne uitgereik (webwerf opgedateer: 21 April2020) en FDA het beleid uitgereik vir diagnostiese toetse vir Coronavirus-siekte-2019 tydens die noodgeval in die openbare gesondheid (uitgereik op 16,2020 op 16,20202020 ), waarin serologiese toetsing van die IgM/IgG -teenliggaampies slegs as 'n siftingstoets gekies is.
Nukleïensuuropsporingsmetode
RT_PCR is 'n baie sensitiewe nukleïensuurtoets wat ontwerp is om op te spoor of die nuwe coronavirus RNA in die respiratoriese of ander monster teenwoordig is. 'N Positiewe PCR-toetsresultaat beteken die teenwoordigheid van nuwe Coronavirus RNA in die monster om die Covid-19-infeksie te bevestig. 'N Negatiewe PCR -toetsresultaat beteken nie die afwesigheid van die virusinfeksie nie, omdat dit beïnvloed kan word deur 'n swak steekproefgehalte of die tydpunt van die siekte in die herstelde fase, ens. Alhoewel RT-PCR 'n baie sensitiewe toets is, het dit verskeie nadele. RT-PCR-toetse kan arbeidsintensief en tydrowend wees, uiters belangrik afhanklik van die hoë gehalte van die monster. Dit kan 'n uitdaging wees omdat die hoeveelheid virale RNA nie net geweldig wissel tussen verskillende pasiënte nie, maar ook binne dieselfde pasiënt kan wissel, afhangende van die tydpunte wanneer die monster versamel word, sowel as die infeksiefases of die aanvang van kliniese simptome. Die opsporing van die nuwe koronavirus benodig monsters van hoë gehalte wat 'n voldoende hoeveelheid ongeskonde virale RNA bevat.
Die RT-PCR-toets kan 'n verkeerde negatiewe resultaat (vals negatief) gee vir sommige pasiënte wat COVID-19-infeksie het. Soos ons weet, is die belangrikste infeksieplekke van die nuwe coronavirus by die long en die onderste asemhalingskanaal, soos Alveoli en Bronchi, geleë. Daarom is die sputummonster van 'n diep hoes of die brongoalveolêre spoelwater (BALF) wat beskou word as die hoogste sensitiwiteit vir virale opsporing. In die kliniese praktyk word monsters egter dikwels uit die boonste asemhalingskanaal versamel deur nasofaryngeale of orofaringeale deppers te gebruik. Die versameling van hierdie monsters is nie net ongemaklik vir pasiënte nie, maar benodig ook spesiaal opgeleide personeel. Om steekproefneming minder indringend of makliker te maak, kan die pasiënte in sommige gevalle 'n orale depper kry en hulle toelaat om 'n monster uit die bukkale mukosa of tong te neem wat hulself verswak. Sonder voldoende virale RNA, kan RT-QPCR 'n vals-negatiewe toetsuitslag teruggee. In Hubei-provinsie, China, is RT-PCR-sensitiwiteit in die aanvanklike opsporing slegs ongeveer 30%-50%gerapporteer, met 'n gemiddeld van 40%. Die hoë tempo van vals-negatief is waarskynlik veroorsaak deur onvoldoende steekproefneming.
Daarbenewens vereis die RT-PCR-toets hoogs opgeleide personeel om komplekse RNA-ekstraksie-stappe en PCR-versterkingsprosedure uit te voer. Dit verg ook 'n hoër vlak van bioveiligheidsbeskerming, spesiale laboratoriumfasiliteit en intydse PCR-instrument. In China moet die RT-PCR-toets vir COVID-19-opsporing uitgevoer word in Biosafety Level 2 Laboratories (BSL-2), met personeelbeskerming met behulp van Biosafety-vlak 3 (BSL-3) -praktyk. Onder hierdie vereistes kon die kapasiteit van China Wuhan se CDC -laboratorium van die begin van Januarie tot begin Februarie 2020 slegs 'n paar honderd gevalle per dag opspoor. Normaalweg sou dit nie 'n probleem wees as u ander aansteeklike siektes toets nie. By die hantering van 'n wêreldwye pandemie soos COVID-19 met potensieel miljoene mense wat getoets moet word, word RT-PCR egter 'n kritieke probleem vanweë die vereistes vir spesiale laboratoriumfasiliteite of tegniese toerusting. Hierdie nadele kan die RT-PCR beperk om gebruik te word as 'n doeltreffende instrument vir die sifting, en dit kan ook lei tot vertragings in die verslae van toetsresultate.
Serologiese teenliggaamopsporingsmetode
Met die vordering van die siekte -kursus, veral in die middel- en laat stadiums, is die opsporingskoers van die teenliggaam baie hoog. 'N Studie in die Wuhan Central South-hospitaal het getoon dat die teenliggaam-opsporingskoers in die derde week van COVID-19-infeksie meer as 90% kan bereik. Die teenliggaampie is ook die produk van die menslike immuunrespons teen die nuwe coronavirus. Die teenliggaamtoets bied verskeie voordele bo RT-PCR. Eerstens toets die serologiese teenliggaampie eenvoudig en vinnig. Teenliggaamse laterale vloeitoetse kan gebruik word vir die versorging van die versorging om binne 15 minute 'n resultaat te lewer. Tweedens is die teiken wat deur die serologiese toets opgespoor is, die teenliggaampie, wat bekend is dat dit baie stabieler is as virale RNA. Tydens die versameling, vervoer, berging en toetsing is die monsters vir teenliggaamtoetse oor die algemeen meer stabiel as die monsters vir RT-PCR. Derdens, omdat die teenliggaam eweredig in die bloedsomloop versprei is, is daar minder steekproefvariasie in vergelyking met die nukleïensuurtoets. Die monstervolume wat benodig word vir die teenliggaamtoets is relatief klein. Byvoorbeeld, 10 mikroliter met vingerprick-bloed is voldoende vir gebruik in die laterale vloeitoets van die teenliggaampie.
Oor die algemeen word die teenliggaamtoets gekies as 'n aanvullingsinstrument vir die opsporing van nukleïensuur om die opsporingstempo van die nuwe koronavirus tydens die siektekursusse te verbeter. As die teenliggaamtoets saam met 'n nukleïensuurtoets gebruik word, kan dit die akkuraatheid van die toets vir die diagnose van COVID19 verhoog deur potensiële vals-positiewe en vals-negatiewe resultate te verminder. Die huidige bedryfsgids beveel nie aan dat twee soorte toets afsonderlik as 'n onafhanklike opsporingsformaat gebruik word nie, maar moet as 'n gekombineerde formaat gebruik word. [2]
Figuur 2:Die korrekte interpretasie van nukleïensuur- en teenliggaamtoetsresultate vir die opsporing van nuwe coronavirus -infeksie
Figuur 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Nuwe Coronavirus IgM/IgG-teenliggaampie Dual Rapid Test Kit (StrongStep®SARS-COV-2 IgM/IgG-teenliggaampie-vinnige toets, latex-immunochromatografie)
Figuur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Nuwe Coronavirus (SARS-COV-2) multiplex real-time PCR-stel (opsporing vir drie gene, fluoresserende sonde-metode).
Opmerking:Hierdie hoogs sensitiewe, gereed-vir-gebruik PCR-stel is beskikbaar in gevriesdroogde formaat (vriesdroogproses) vir langtermynberging. Die stel kan by kamertemperatuur vervoer en geberg word en is vir een jaar stabiel. Elke buis van Premix bevat al die reagense wat benodig word vir die PCR-versterking, insluitend omgekeerde-transcriptase, TAQ-polimerase, primers, ondersoeke en DNTPS-substrate. Gebruikers kan die mengsel eenvoudig weer opstaan deur PCR-graadwater by te voeg saam met die templaat en dan las op 'n PCR -instrument om die versterking uit te voer.
In reaksie op die roman Coronavirus-uitbraak, het Liming Bio-Products Co., Ltd. vinnig gewerk om twee diagnostiese stelle te ontwikkel om kliniese en openbare gesondheidslaboratoriums in staat te stel om Covid-19-infeksie vinnig te diagnoseer. Hierdie stelle is baie geskik vir gebruik vir grootskaalse sifting in lande en streke waar die nuwe uitbraak van Coronavirus vinnig versprei, en om diagnose en bevestiging vir Covid-19-infeksie te bied. Hierdie stelle is slegs vir gebruik onder vooraf-opgemerkte noodgebruikmagtiging (PEUA). Toetsing is beperk tot laboratoriums wat gesertifiseer is onder die regulasies van die nasionale of plaaslike owerhede.
Antigeenopsporingsmetode
1. Virale antigeenopsporing word in dieselfde kategorie direkte opsporing as nukleïensuuropsporing geklassifiseer. Hierdie direkte opsporingsmetodes kyk na bewyse van virale patogene in die monster en kan gebruik word vir bevestigingsdiagnose. Die ontwikkeling van antigeenopsporingstelle benodig egter 'n hoë gehalte monoklonale teenliggaampies met 'n sterk affiniteit en 'n hoë sensitiwiteit wat patogene virusse kan herken en vaslê. Dit neem gewoonlik meer as ses maande om 'n monoklonale teenliggaampie te kies en te optimaliseer wat geskik is vir gebruik in die voorbereiding van die antigeenopsporingskit.
2. Tans is die reagense vir direkte opsporing van die nuwe coronavirus steeds onder navorsings- en ontwikkelingsfase. Daarom is geen antigeenopsporingskit klinies bekragtig en kommersieel beskikbaar nie. Alhoewel daar voorheen berig is dat 'n diagnostiese firma in Shenzhen 'n antigeenopsporingskit ontwikkel het en klinies in Spanje getoets is, kon die betroubaarheid en akkuraatheid van die toets nie bekragtig word nie weens die teenwoordigheid van reagensgehalte. Tot op hede het NMPA (voormalige China FDA) nog geen antigeenopsporingskit vir kliniese gebruik goedgekeur nie. Ten slotte is 'n verskeidenheid opsporingsmetodes ontwikkel. Elke metode het sy voordele en beperkings. Die resultate van verskillende metodes kan gebruik word vir verifikasie en komplement.
3. Die vervaardiging van 'n kwaliteit COVID-19-toetsstel hang sterk af van optimalisering tydens navorsing en ontwikkeling. Liming Bio-Product Co., Ltd. Toetsstelle is nodig om aan streng vervaardigings- en kwaliteitskontrolestandaarde te voldoen om te verseker dat dit die hoogste vlakke van prestasie en konsekwentheid bied. Die wetenskaplikes by Liming Bio-Product Co., Ltd., het meer as twintig jaar ervaring in die ontwerp, toetsing en optimalisering van in vitro-diagnostiese stelle om die hoogste vlak van prestasie in analitiese kwantifisering te verseker.
Tydens die Covid-19-pandemie het die Chinese regering 'n toename in die groot vraag na epidemiese voorkomingsmateriaal in die internasionale hotspots gehad. Op 5 April, op die perskonferensie van die Staatsraad Gesamentlike Voorkomings- en Beheermeganisme "Die versterking van die kwaliteitsbestuur van mediese materiale en die regulering van die orde van die mark", Jiang Fan, 'n eerste vlak inspekteur van die departement van buitelandse handel van die Ministerie van handel, het gesê: "Vervolgens sal ons ons pogings op twee aspekte, eerstens, fokus om die ondersteuning van meer mediese voorrade wat deur die internasionale gemeenskap benodig word, te bespoedig, en ook om kwaliteitskontrole, regulering en bestuur van die produkte te verbeter. Ons sal China se bydrae lewer om gesamentlik op die wêreldwye epidemie te reageer en 'n gemeenskap met 'n gedeelde toekoms vir die mensdom te bou.
Figuur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd. se roman Coronavirus Reagent het die EU CE-registrasiesertifikaat verkry
Die eresertifikaat
Houshenshan
Figuur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. het Wuhan Vulcan (Houshenshan) berghospitaal ondersteun om teen die Covid-19-epidemie te veg en is die eresertifikaat van Wuhan Red Cross bekroon. Wuhan Vulcan Mountain Hospital is die beroemdste hospitaal in China wat spesialiseer in die behandeling van ernstige Covid - 19 pasiënte.
Terwyl die roman Coronavirus-uitbraak oor die hele wêreld voortgaan, is Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd., om gemeenskappe wêreldwyd te ondersteun en te help met ons innoverende tegnologieë om hierdie ongekende wêreldwye bedreiging te beveg. Vinnige toetsing van COVID-19-infeksie is 'n kritieke deel van die aanspreek van hierdie bedreiging. Ons lewer steeds op 'n beduidende manier bydra deur diagnostiese platforms van hoë gehalte in die hande van die voorste gesondheidsorgwerkers te voorsien, sodat mense die kritieke toetsresultate kan ontvang wat hulle benodig. Liming Bio-Products Co., Ltd. se pogings in die stryd teen Covid-19-pandemie, is om ons tegnologie, ervarings en kundigheid by te dra tot internasionale gemeenskappe vir die oprigting van 'n wêreldgemeenskap van die lot.
Lang pers ~ skandeer en volg ons
E -pos: sales@limingbio.com
Webwerf: https://limingbio.com
Postyd: Mei-01-2020
