Een wêreld een geveg
─Internasionale samewerking om 'n globale gemeenskap van gemeenskaplike lot te bou wat reageer op COVID-19 pandemie-uitdaging
Die nuwe koronavirus wat oor die wêreld spoel, het gelei tot 'n voortdurende wêreldwye COVID-19-pandemiekrisis.Die nuwe koronavirus het geen grense nie, geen land sal van hierdie stryd teen COVID-19 gespaar word nie.In reaksie op hierdie wêreldwye COVID-19-pandemie, lewer Liming Bio-Products Corp bydraes om die welstand van ons globale gemeenskappe te ondersteun.
Ons wêreld word tans gekonfronteer met die ongekende impak van die nuwe koronavirussiekte 2019 (COVID-19) pandemie.Tot op datum is daar geen doeltreffende middel beskikbaar vir die behandeling van hierdie siekte nie.Baie diagnostiese toetse is egter ontwikkel vir die opsporing van COVID-19.Hierdie toetse is gebaseer op molekulêre of serologiese metodes om die nuwe koronavirus-spesifieke nukleïensuur- of teenliggaambiomerkers op te spoor.Aangesien COVID-19 'n pandemie-status bereik het, is vroeë diagnose van die nuwe koronavirusinfeksie van kritieke belang om die verspreiding van die virus te bepaal en dit te bevat, maar 'n perfekte toets vir universele gebruik bestaan nog nie.Ons moet weet watter toetse moontlik gebruik kan word vir sifting, diagnose en monitering van die COVID-19-infeksie, en wat hul beperkings is.Dit is baie belangrik hoe om hierdie wetenskaplike hulpmiddels beter te gebruik en om die opkoms van hierdie vinnig verspreide en ernstige siekte te help identifiseer en beheer.
Die doel van die opsporing van die nuwe koronavirus is om te bepaal of 'n individu wat COVID-19-infeksie het of 'n asimptotiese draer wat die virus stil kan versprei, om noodsaaklike inligting te verskaf om besluitneming vir kliniese behandeling te lei.Vorige studies het getoon dat 70% van kliniese besluite afhang van die toetsresultate.Wanneer verskillende opsporingsmetodes gebruik word, verskil die vereistes van die opsporingsreagensstelle ook.
Figuur 1
Figuur 1:Diagram wat die sleutelstadia van algemene biomerkervlakke tydens die tipiese tydsverloop van COVID-19-infeksie toon.Die X-as dui die aantal dae van infeksie aan, en die Y-as dui die virale lading, konsentrasie van antigene en konsentrasie van teenliggaampies in verskillende tydperke aan.Teenliggaampies verwys na IgM- en IgG-teenliggaampies.Beide RT-PCR en antigeenopsporing word gebruik om die teenwoordigheid of afwesigheid van nuwe koronavirus op te spoor, wat direkte bewyse is vir vroeë opsporing van pasiënte.Binne 'n week van virale infeksie word PCR-opsporing of antigeenopsporing verkies.Na die nuwe koronavirusinfeksie vir ongeveer 7 dae, het die IgM-teenliggaampie teen die nuwe koronavirus geleidelik in die pasiënt se bloed toegeneem, maar die duur van die bestaan is kort en die konsentrasie daarvan neem vinnig af.Daarteenoor verskyn die IgG-teenliggaampie teen die virus later, gewoonlik ongeveer 14 dae na die virusinfeksie.Die IgG-konsentrasie neem geleidelik toe, en dit bly 'n lang tydperk in die bloed.Dus, as die IgM in die pasiënt se bloed opgespoor word, beteken dit dat die virus onlangs besmet is, wat 'n vroeë infeksiemerker is.Wanneer die IgG-teenliggaam in die pasiënt se bloed opgespoor word, beteken dit dat die virusinfeksie al 'n geruime tyd is.Dit word ook laat infeksie of vorige infeksie genoem.Dit word dikwels gesien by pasiënte wat in die herstelfase is.
Die biomerkers van nuwe koronavirus
Die nuwe koronavirus is 'n RNA-virus wat uit proteïene en nukleïensure bestaan.Die virus dring die gasheer (mens)liggaam binne, gaan selle binne deur die bindingsplek wat ooreenstem met reseptor ACE2, en repliseer in gasheerselle, wat veroorsaak dat die menslike immuunstelsel op vreemde indringers reageer en spesifieke teenliggaampies produseer.Daarom kan die nukleïensure en antigene van die flessie, en spesifieke teenliggaampies teen nuwe koronavirus teoreties gebruik word as spesifieke biomerkers vir die opsporing van die nuwe koronavirus.Vir nukleïensuuropsporing word RT-PCR-tegnologie die algemeenste gebruik, terwyl serologiese metodes algemeen gebruik word vir die opsporing van die nuwe koronavirus-spesifieke teenliggaampies.Tans is daar 'n verskeidenheid toetsmetodes beskikbaar wat ons kan kies om COVID-19-infeksie te toets [1].
Basiese beginsels van hooftoetsmetodes vir nuwe koronavirus
Baie diagnostiese toetse vir COVID_19 is tot dusver beskikbaar, met meer toetsstelle wat elke dag goedkeuring ontvang onder 'n magtiging vir noodgebruik.Alhoewel die nuwe toetsontwikkelings met soveel verskillende name en formate uitkom, maak al die huidige COVID_19-toetse basies staat op twee hooftegnologieë: nukleïensuuropsporing vir die virale RNA en serologiese immunotoetse wat virale-spesifieke teenliggaampies (IgM en IgG) opspoor.
01. Nukleïensuur opsporing
Omgekeerde transkripsie-polimerase kettingreaksie (RT-PCR), lus-gemedieerde isotermiese amplifikasie (LAMP), en volgende-generasie volgordebepaling (NGS) is die algemene nukleïensuurmetodes vir die opsporing van nuwe koronavirus-RNA.RT-PCR is die eerste tipe toets vir COVID-19, aanbeveel deur beide die Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) en die Amerikaanse Sentrum vir Siektebeheer en -voorkoming (CDC).
02.Serologiese teenliggaamopsporing
Teenliggaampies is 'n beskermende proteïen wat in die menslike liggaam geproduseer word in reaksie op die virusinfeksie.Die IgM is 'n vroeë tipe teenliggaam, terwyl IgG 'n latere tipe teenliggaam is.Die serum- of plasmamonster word gewoonlik ondersoek vir die teenwoordigheid van spesifieke IgM- en IgG-tipes van die teenliggaampie vir assessering van akute en herstelfases van COVID-19-infeksie.Hierdie teenliggaam-gebaseerde opsporingsmetodes sluit in kolloïdale goud-immunochromatografie-toets, lateks- of fluoresserende mikrosfeer-immunochromatografie, ensiem-gekoppelde immunosorbent-toets (ELISA) en chemiluminescensie-toets.
03. Virale antigeen opsporing
Antigeen is 'n struktuur op die virus wat deur die menslike liggaam herken word wat die immuunverdedigingstelsel veroorsaak om teenliggaampies te produseer om die virus uit bloed en weefsel te verwyder.'n Virale antigeen teenwoordig op die virus kan geteiken en opgespoor word deur immunoassay te gebruik.Soos virale RNA, is virale antigene ook teenwoordig in die respiratoriese kanaal van besmette individue en kan dit gebruik word om die akute fase van die COVID-19-infeksie te diagnoseer.Daarom word dit dikwels aanbeveel om boonste respiratoriese monsters soos speeksel, nasofaryngeale en orofaryngeale deppers, diep hoessputum, brongoalveolêre spoelvloeistof (BALF) vir aanvanklike antigeentoetsing te versamel.
Seleksie van toetsmetodes vir nuwe koronavirus
Die keuse van 'n toetsmetode behels baie faktore, insluitend kliniese omgewing, toetsgehaltebeheer, omkeertyd, toetskoste, monsternemingmetodes, laboratoriumpersoneel tegniese vereistes, fasiliteit- en toerustingvereistes.Die opsporing van nukleïensure of virale antigene is om direkte bewyse van die teenwoordigheid van die virusse te verskaf en die diagnose van nuwe koronavirusinfeksie te bevestig.Alhoewel daar baie metodes vir antigeenopsporing is, is hul opsporingsensitiwiteit van die nuwe koronavirus teoreties laer as dié van die RT-PCR-amplifikasie.Teenliggaamtoetsing is die opsporing van anti-virus teenliggaampies wat in die menslike liggaam geproduseer word, wat met tyd agterbly en dikwels nie vir vroeë opsporing tydens die akute fase van virusinfeksie gebruik kan word nie.Die kliniese omgewing vir opsporingstoepassings kan verskil, en die monsterversamelingsplekke kan ook verskil.Vir die opsporing van virale nukleïensure en antigene, moet die monster in die respiratoriese kanaal waar die virus teenwoordig is, soos nasofaryngeale deppers, orofaryngeale deppers, sputum of brongoalveolêre spoelvloeistof (BALF) versamel word.Vir teenliggaam-gebaseerde opsporing, moet bloedmonsters versamel en ondersoek word vir die teenwoordigheid van spesifieke anti-virus teenliggaampies (IgM/IgG).Teenliggaampies en nukleïensuurtoetsresultate kan egter mekaar aanvul.Byvoorbeeld, wanneer die toetsresultaat die nukleïensuur-negatief, IgM-negatief maar IgG-positief is, dui hierdie resultate aan dat die pasiënt nie tans die virus dra nie, maar van die nuwe koronavirusinfeksie herstel is.[2]
Voor- en nadele van nuwe koronavirustoetse
In die diagnose- en behandelingsprotokol vir nuwe koronavirus-longontsteking (proefweergawe 7) (vrygestel deur die nasionale gesondheidskommissie en staatsadministrasie van tradisionele Chinese medisyne op 3 Maart 2020), word nukleïensuurtoetsing gebruik as die goue standaardmetode vir die diagnose van die roman koronavirusinfeksie, terwyl teenliggaamtoetsing ook as een van die bevestigingsmetodes vir die diagnose beskou word.
Patogeniese en serologiese bevindings
(1) Patogeniese bevindings: Nuwe koronavirusnukleinsuur kan opgespoor word in nasofaryngeale deppers, sputum, onderste lugwegafskeidings, bloed, ontlasting en ander monsters deur gebruik te maak van RT-PCRen/of NGS-metodes.Dit is meer akkuraat as monsters van onderste lugweg (sputum of lugwegekstraksie) verkry word.Die monsters moet so gou moontlik na versameling vir toetsing ingedien word.
(2) Serologiese bevindings: NCP-virusspesifieke IgM word ongeveer 3-5 dae na aanvang waarneembaar;IgG bereik 'n titrasie van ten minste 4-voudige toename tydens herstel in vergelyking met die akute fase.
Die keuse van toetsmetodes hang egter af van geografiese liggings, mediese regulasies en kliniese instellings.In die VSA het die NIH behandelingsriglyne vir koronavirussiekte 2019 (COVID-19) uitgereik (werf bygewerk: 21 April 2020) en FDA-beleid vir diagnostiese toetse vir koronavirussiekte-2019 tydens die openbare gesondheidsnood (uitgereik op 16 Maart 2020) ), waarin serologiese toetsing van die IgM/IgG-teenliggaampies slegs as 'n siftingstoets gekies is.
Nukleïensuuropsporingsmetode
RT_PCR is 'n hoogs sensitiewe nukleïensuurtoets wat ontwerp is om vas te stel of die nuwe koronavirus-RNA in die respiratoriese of ander monster teenwoordig is of nie.'n Positiewe PCR-toetsuitslag beteken die teenwoordigheid van nuwe koronavirus-RNA in die monster om die COVID-19-infeksie te bevestig.'n Negatiewe PCR-toetsuitslag beteken nie die afwesigheid van die virusinfeksie nie, want dit kan beïnvloed word deur swak monsterkwaliteit of siektetydpunt by die herstelfase, ens.Alhoewel RT-PCR 'n hoogs sensitiewe toets is, het dit verskeie nadele.RT-PCR-toetse kan arbeidsintensief en tydrowend wees, en is uiters afhanklik van die hoë gehalte van die monster.Dit kan 'n uitdaging wees, want die hoeveelheid virale RNA verskil nie net geweldig tussen verskillende pasiënte nie, maar kan ook binne dieselfde pasiënt verskil, afhangende van die tydpunte wanneer die monster ingesamel word asook die infeksiefases of die aanvang van kliniese simptome.Die opsporing van die nuwe koronavirus vereis monsters van hoë gehalte wat 'n voldoende hoeveelheid ongeskonde virale RNA bevat.
Die RT-PCR-toets kan 'n verkeerde negatiewe resultaat (vals negatief) gee vir sommige pasiënte wat COVID-19-infeksie het.Soos ons weet, is die belangrikste infeksieplekke van die nuwe koronavirus by die longe en die onderste lugweg geleë, soos alveoli en brongi.Daarom word die sputummonster van 'n diep hoes of die brongoalveolêre spoelvloeistof (BALF) beskou as die hoogste sensitiwiteit vir virale opsporing.In die kliniese praktyk word monsters egter dikwels van die boonste lugweg versamel deur nasofaryngeale of orofaryngeale deppers te gebruik.Die versameling van hierdie monsters is nie net ongemaklik vir pasiënte nie, maar vereis ook spesiaal opgeleide personeel.Om monsterneming minder indringend of makliker te maak, kan die pasiënte in sommige gevalle 'n monddepper gegee word en hulle toelaat om 'n monster van die bukkale slymvlies of tong te neem en hulself te depper.Sonder voldoende virale RNA kan RT-qPCR 'n vals-negatiewe toetsresultaat gee.In die Hubei-provinsie, China, is RT-PCR-sensitiwiteit in die aanvanklike opsporing slegs sowat 30%-50% gerapporteer, met 'n gemiddeld van 40%.Die hoë koers van vals-negatiewe is heel waarskynlik veroorsaak deur onvoldoende steekproefneming.
Daarbenewens vereis die RT-PKR-toets hoogs opgeleide personeel om komplekse RNA-ekstraksiestappe en PCR-amplifikasieprosedure uit te voer.Dit vereis ook 'n hoër vlak van bioveiligheidbeskerming, spesiale laboratoriumfasiliteit en intydse PCR-instrument.In China moet die RT-PCR-toets vir COVID-19-opsporing in bioveiligheidsvlak 2-laboratoriums (BSL-2) uitgevoer word, met personeelbeskerming deur bioveiligheidsvlak 3 (BSL-3) praktyk te gebruik.Onder hierdie vereistes, van begin Januarie tot vroeg Februarie 2020, kon die kapasiteit van China Wuhan se CDC-laboratorium slegs 'n paar honderd gevalle per dag opspoor.Normaalweg sal dit nie 'n probleem wees wanneer ander aansteeklike siektes getoets word nie.Wanneer daar egter met 'n wêreldwye pandemie soos COVID-19 te doen word met potensieel miljoene mense wat getoets moet word, word RT-PCR 'n kritieke kwessie vanweë die vereistes vir spesiale laboratoriumfasiliteite of tegniese toerusting.Hierdie nadele kan die RT-PCR beperk om as 'n doeltreffende instrument vir sifting te gebruik, en kan ook lei tot vertragings in die verslae van toetsresultate.
Serologiese teenliggaam opsporing metode
Met die vordering van die siekteverloop, veral in die middel- en laat stadiums, is die teenliggaamopsporingsyfer baie hoog.'n Studie in die Wuhan Sentraal-Suid-hospitaal het getoon dat die teenliggaamopsporingsyfer meer as 90% kan bereik in die derde week van COVID-19-infeksie.Die teenliggaam is ook die produk van die menslike immuunrespons teen die nuwe koronavirus.Die teenliggaamtoets bied verskeie voordele bo RT-PCR.Eerstens, die serologiese teenliggaampie toets eenvoudig en vinnig.Teenliggaam laterale vloeitoetse kan gebruik word vir punt-van-sorg om 'n resultaat in 15 minute te lewer.Tweedens, die teiken wat deur die serologiese toets opgespoor word, is die teenliggaam, wat bekend is dat dit baie meer stabiel is as virale RNA.Tydens versameling, vervoer, berging en toetsing is die monsters vir teenliggaamtoetse oor die algemeen meer stabiel as die monsters vir RT-PCR.Derdens, omdat die teenliggaam eweredig in die bloedsirkulasie versprei is, is daar minder monsternemingsvariasie in vergelyking met die nukleïensuurtoets.Die monstervolume benodig vir die teenliggaamtoets is relatief klein.Byvoorbeeld, 10 mikroliter vingerprikbloed is voldoende vir gebruik in die teenliggaam laterale vloeitoets.
Oor die algemeen word die teenliggaamtoets gekies as 'n aanvullingsinstrument vir nukleïensuuropsporing om die opsporingstempo van die nuwe koronavirus tydens die siektekursusse te verbeter.Wanneer die teenliggaamtoets saam met 'n nukleïensuurtoets gebruik word, kan dit die akkuraatheid van die toets vir die diagnose van COVID19 verhoog deur potensiële vals-positiewe en vals-negatiewe resultate te verminder.Die huidige operasiegids beveel nie aan om twee tipes toetse afsonderlik as 'n onafhanklike opsporingsformaat te gebruik nie, maar moet as 'n gekombineerde formaat gebruik word.[2]
Figuur 2:Die korrekte interpretasie van nukleïensuur- en teenliggaampiestoetsresultate vir die opsporing van nuwe koronavirusinfeksie
Figuur 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – Nuwe koronavirus IgM/IgG-teenliggaampie dubbele vinnige toetsstel (StrongStep®SARS-CoV-2 IgM/IgG Teenliggaampies vinnige toets, lateksimmunochromatografie)
Figuur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Nuwe Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR kit (opsporing vir drie gene, fluoresserende sonde metode).
Let wel:Hierdie hoogs sensitiewe, gereed-vir-gebruik PCR-stel is beskikbaar in gevriesdroogde formaat (vriesdroogproses) vir langtermynberging.Die kit kan by kamertemperatuur vervoer en gestoor word en is stabiel vir een jaar.Elke buis voormengsel bevat al die reagense wat nodig is vir die PCR-amplifikasie, insluitend omgekeerde transkripsie, Taq-polimerase, primers, probes en dNTPs-substrate. Gebruikers kan eenvoudig die mengsel hersaamstel deur PCR-graad water saam met die sjabloon by te voeg en dan te laai op 'n PCR-instrument om die amplifikasie uit te voer.
In reaksie op die nuwe koronavirus-uitbraak, het Liming Bio-Products Co., Ltd. vinnig gewerk om twee diagnostiese stelle te ontwikkel om kliniese en openbare gesondheidslaboratoriums in staat te stel om COVID-19-infeksie vinnig te diagnoseer.Hierdie stelle is baie geskik vir gebruik vir grootskaalse sifting in lande en streke waar die nuwe koronavirus-uitbraak vinnig versprei, en om diagnose en bevestiging vir COVID-19-infeksie te verskaf.Hierdie stelle is slegs vir gebruik onder Pre-notified Emergency Use Authorization (PEUA).Toetsing is beperk tot laboratoriums wat ingevolge die regulasies van die nasionale of plaaslike owerhede gesertifiseer is.
Antigeen opsporing metode
1. Virale antigeenopsporing word in dieselfde kategorie van direkte opsporing as nukleïensuuropsporing geklassifiseer.Hierdie direkte opsporingsmetodes soek bewyse van virale patogene in die monster en kan vir bevestigingsdiagnose gebruik word.Die ontwikkeling van antigeen-opsporingsstelle vereis egter hoë kwaliteit monoklonale teenliggaampies met sterk affiniteit en hoë sensitiwiteit wat in staat is om patogene virusse te herken en vas te vang.Dit neem gewoonlik meer as ses maande om 'n monoklonale teenliggaam te kies en te optimaliseer wat geskik is vir gebruik in die voorbereiding van die antigeenopsporingstel.
2. Tans is die reagense vir die direkte opsporing van die nuwe koronavirus nog in navorsings- en ontwikkelingstadium.Daarom is geen antigeen-opsporingstel klinies bekragtig en kommersieel beskikbaar nie.Alhoewel daar voorheen berig is dat 'n diagnostiese firma in Shenzhen 'n antigeenopsporingstel ontwikkel het en klinies in Spanje getoets is, kon die toetsbetroubaarheid en akkuraatheid nie bekragtig word nie weens die teenwoordigheid van reagenskwaliteitkwessies.Tot op hede het NMPA (voormalige China FDA) nog geen antigeen-opsporingstel vir kliniese gebruik goedgekeur nie.Ten slotte, 'n verskeidenheid opsporingsmetodes is ontwikkel.Elke metode het sy voordele en beperkings.Die resultate van verskillende metodes kan vir verifikasie en aanvulling gebruik word.
3. Die vervaardiging van 'n kwaliteit COVID-19-toetsstel hang sterk af van optimalisering tydens navorsing en ontwikkeling.Liming Bio-Product Co., Ltd.toetsstelle word vereis om aan streng vervaardigings- en kwaliteitbeheerstandaarde te voldoen om te verseker dat dit die hoogste vlakke van werkverrigting en konsekwentheid bied.Die wetenskaplikes by Liming Bio-Product Co., Ltd. het meer as twintig jaar ondervinding in die ontwerp, toetsing en optimalisering van in vitro diagnostiese stelle om die hoogste vlak van prestasie in analitiese kwantifisering te verseker.
Tydens die COVID-19-pandemie het die Chinese regering te kampe gehad met die groot vraag na materiaal vir die voorkoming van epidemies in die internasionale brandpunte.Op 5 April, op die perskonferensie van die Staatsraad Gesamentlike Voorkoming- en Beheermeganisme "Versterking van die kwaliteitbestuur van mediese materiaal en regulering van die orde van die mark", Jiang Fan, 'n eerstevlak-inspekteur van die departement van buitelandse handel van die ministerie. of Commerce, het gesê: "Volgende sal ons ons pogings op twee aspekte fokus, eerstens om die ondersteuning van meer mediese voorrade wat deur die internasionale gemeenskap benodig word, te bespoedig, en ook om gehaltebeheer, regulering en bestuur van die produkte te verbeter. Ons sal China se bydrae lewer om gesamentlik op die wêreldwye epidemie te reageer en 'n gemeenskap met 'n gedeelde toekoms vir die mensdom te bou.
Figuur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd. se nuwe koronavirusreagens het die EU CE-registrasiesertifikaat verwerf
Die eresertifikaat
Houshenshan
Figuur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. het Wuhan Vulcan(HouShenShan)-berghospitaal ondersteun om teen die COVID-19-epidemie te veg en is met die eresertifikaat van Wuhan Rooi Kruis toegeken.Wuhan Vulcan-berghospitaal is die bekendste hospitaal in China wat spesialiseer in die behandeling van ernstige COVID-19 pasiënte.
Namate die nuwe koronavirus-uitbraak steeds oor die wêreld versprei, stap Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. op om gemeenskappe wêreldwyd te ondersteun en te help met ons innoverende tegnologieë om hierdie ongekende globale bedreiging te beveg.Vinnige toetsing van COVID-19-infeksie is 'n kritieke deel om hierdie bedreiging aan te spreek.Ons gaan voort om op 'n beduidende manier by te dra deur diagnostiese platforms van hoë gehalte in die hande van gesondheidsorgwerkers in die voorste linie te verskaf sodat mense die kritieke toetsresultate kan ontvang wat hulle nodig het.Liming Bio-products Co., Ltd. se pogings in die stryd teen COVID-19-pandemie is om ons tegnologieë, ervarings en kundigheid by te dra tot internasionale gemeenskappe vir die bou van 'n wêreldwye lotsgemeenskap.
Lang druk ~ Skandeer en volg ons
E-pos: sales@limingbio.com
Webwerf: https://limingbio.com
Postyd: Mei-01-2020
